TECHNIQUES D'ENSEMENCEMENT

L’ensemencement consiste à déposer dans un milieu neuf des germes prélevés dans un milieu de culture mère. Le transport est en général effectué avec une anse ou une pipette Pasteur.

1 / Ensemencement avec une anse:



- prendre les précautions nécessaires pour travailler dans de bonnes conditions d’aseptie

( nettoyage paillasse, mains ... )

- veiller à travailler dans la zone stérile autour du bec Bunsen

- tenir le tube contenant la culture mère dans la main gauche, déboucher près de la flamme et garder le coton dans la main.

- flamber l’ouverture du tube.

- stériliser l’anse en la portant au rouge dans la flamme du bec Bunsen, la laisser refroidir dans la zone stérile.

- prélever et repiquer rapidement dans le tube contenant le milieu de repiquage :

. repiquage dans un milieu liquide : repiquer ce qui est prélevé à l’intérieur de la boucle

. repiquage sur milieu solide : repiquer en déplaçant en zig zag l’aiguille sur la surface de l’agar, du fond du tube vers l’ouverture, en prenant soin de ne pas érafler la gélose

- repasser dans la flamme l’aiguille à ensemencer en la portant au rouge. L’aiguille est prête pour un nouvel ensemencement .

- flamber l’ouverture des tubes, flamber légèrement les cotons, boucher.

2 / Technique d'ensemencement avec la pipette Pasteur :

Les manipulations se différencient des précédentes par quelques détails :


- la pipette est passée rapidement dans la flamme.

- l'effilure est cassée à la pince dans la zone stérile.

- on aspire les bouillons de culture ( éviter que le bouillon de culture souille le coton, danger d'infection pour le manipulateur, pas plus que la salive du manipulateur, danger d'infection pour la culture )

- on souffle pour ensemencer dans le tube stérile.

- la pipette ne sert qu'une fois.

الموضوع الأصلي : TECHNIQUES D'ENSEMENCEMENT  المصدر : منتديات طلاب جامعة سيدي بلعباس

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